黄连素对鸡球虫的防治效果研究
材料与方法
1.1 试验动物
从上海太平洋家禽育种有限公司购买刚出壳的雏鸡，放入专用鸡盒运回实验室，用无球虫饲料和饮水饲养至9日龄开始试验。试验过程进行保温箱圈养，饲料购自诺维康旗舰店，不含任何药物，采用自由饮水方式。
1.2 虫种与试验药物
试验所用虫种是由中国农业科学院上海兽医研究所馈赠孢子化柔嫩艾美耳球虫，于含新鲜重铬酸钾溶液中保存。黄连素，购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
1.3 试验鸡分组与处理
每组挑选发育均匀、健康的10日龄雏鸡12只，并随机分成4小组：加药A组、加药B组、攻虫对照组和空白对照组。空白对照组既不喂药也不攻虫，攻虫对照组只攻虫不喂药，每只攻虫球虫数5×104个。加药A组和加药B组自10日龄开始每天经口滴服黄连素300或1 500 μg/g体重，直至第17天试验结束。
1.4 测定指标
1.4.1 增重情况。
试验鸡于试验开始前、潜伏期后（约5 d）和试验结束后进行称重，并计算各组的增重，据此计算出平均增重相对增重率。相对增重率（%）=用药组或攻虫组平均增重/空白对照组平均增重×100；死亡率（%）=死亡鸡数/试验用鸡总数×100；发病率（%）=发病鸡数/试验用鸡总数×100。
1.4.2 临床表现。
试验开始后，每天观察鸡群的精神状况、采食和饮水量、死亡情况、粪便色泽和性状，并作好记录。
1.4.3 血便卵囊计数。
于感染第5天采集每组的新鲜血便，采用血球计数板法记录每组每克血便卵囊数。
1.4.4 盲肠卵囊计数 。
于感染后第8天扑杀鸡群，将各组盲肠内容物充分混匀、称重，用血球计数板法统计每克盲肠内容物卵囊数（OPG），根据表1换算成卵囊值[9]。
1.4.5 病变计分及病变值。
第 8 天试验结束，宰杀全部鸡只，参照 Johnson 和 Reid设计的盲肠病变记分法[10]，记录每只鸡的病变记分，将各组内每只鸡的病变记分相加。 病变标准：感染后第8天得到病变值总分，病变值总分除以组内鸡只数得平均病变记分。病变值（0～40）=各试验组鸡的平均病变记分（0～4）×10。
1.4.6 抗球虫指数（ACI）。
根据美国Merck公司推荐的ACI作为判定药物效力的指标： ACI=（存活率+相对增重率）×100-（病变值+卵囊值）。若ACI>180，判定为高效抗球虫药；160 1.4.7 数据处理。 试验数据用SPSS 11.5统计学软件进行统计与分析，并应用最小显著差数法（LSD）分析其差异显著性。 2 结果与分析 2.1 增重情况 从图1可以看出，加药A组在整个试验中相对增重均高于攻虫对照组，表明添加300 μg/g体重黄连素对鸡球虫感染具有一定的抑制效果；但加药B组在球虫感染潜伏期内（第5天）和试验结束后增重均低于加药A组和攻虫对照组，表明当加药浓度过高时，由于黄连素具有减重作用，影响了其对鸡球虫的防治效果。 2.2 临床表现 试验期间，空白对照组的精神、食欲、粪便皆正常；攻虫组的球虫感染到病发有4 d左右的潜伏期，攻虫后第5天开始均出现不同程度的精神萎靡、闭目呆立、食欲不振、羽毛耸立、便血等现象。加药A组出现轻微的脱毛现象，并带有少量的便血，便血率为30%，血便中球虫释放数量为1.97×104个/g，无死亡；加药B组出现轻微脱毛和便血现象，血便中球虫释放数量为0.30×104个/g，并出现30%的致死率；攻虫对照组则有严重的脱毛及便血现象，便血率为75%，血便中球虫释放数量为4.99×104个/g，死亡率为50%（表2）。由此可见，雏鸡便血情况与感染程度具有直接相关性。 2.3 抗虫药效综合判断结果 由表3可知，加药A组和加药B组的抗球虫指数均高于攻虫对照组，表明黄连素对鸡球虫感染具有一定的防治作用。但当加药浓度过高时，黄连素的降脂作用影响了其对球虫的防治效果，加药B组的相对增重率低于加药A组，因此黄连素的最佳治疗浓度有待进一步探索。加药A组的抗球虫指数为141.26，根据抗球虫指数（ACI）标准，在目前浓度下黄连素判定为低效抗球虫药，但加药A组在治疗后临床性状明显改善，并且死亡率为0，因此合适浓度的黄连素对球虫具有显著的防治效果。该研究中试验周期略短导致雏鸡的相对增重率偏低，从而使ACI值偏低，因此试验周期有待加长。 3 讨论 （1）从黄连素控制鸡球虫病发生的效果来看，攻虫对照组雏鸡的发病率为75%，治疗A和治疗B组的发病率为33%；攻虫对照组死亡率为50%，加药A组没有死亡，加药B组死亡率为30%。这表明黄连素具有明显的球虫病控制效果，但过高浓度的黄连素有减重作用，因此选取适当浓度黄连素干预对鸡球虫具有有效的防治效果。 （2）从各组雏鸡的增重来看，与空白对照组比加药A组、加药B组和攻虫对照组的相对增重率分别为55.56%、10.71%和26.43%，其中加药A组的增重率虽不及空白对照组，但要明显高于攻虫对照组，加药B组的增重率低于加药A组和攻虫对照组的增重率。这表明适当浓度黄连素对感染球虫的雏鸡具有一定的保护作用，而过高浓度黄连素虽然可以更好控制感染卵囊数，降低病变值，但可能由于其药物本身具有减重作用[11]，抑制了雏鸡脂代谢和体重增加，因此300 μg/g体重剂量的防治效果优于1 500 μg/g体重。 （3）虽然鸡球虫病的防治的疫苗已取得了初步成效[12]，但由于该技术尚处于起步阶段 ，存在疫苗的稳定性、易被产生抗性、价格较贵等不适用于大型鸡场，因此寻找合适的新型药物防治鸡球虫迫在眉睫。目前常用的治疗球虫的药物地克珠利较易引起球虫的耐药性，甚至交叉耐药性（妥曲珠利），连续服用不得超过6个月，轮换用药时亦不宜应用同类药物。此外，该药物作用时间短暂，必须通过连续用药以防再度爆发。黄连素属于异喹啉生物碱， 作为价格便宜、服用简单的抗菌药在临床上已应用多年，主要用于治疗肠道炎症伴发热、降脂等方面。该试验结果表明黄连素对鸡球虫具有明确的治疗效果，因其价格低廉、方便获得、副作用少等优点，因此它可作为一种可供选择的鸡球虫防制药物。 参考文献 [1] 张龙现，蒋金书，刘群，等.毒害艾美耳球虫纯种卵囊收集鉴定及致病性测定[J].中国兽医杂志，2001，37（9）：12-13. [2] 孔繁瑶.家畜寄生虫学[M].北京：中国农业大学出版社，1997. [3] 宋培勇，曾燕玲，张仁波.鸡球虫病及其防治[J]. 养禽与禽病防治，2010（6）：33-35. [4] 蒋金书. 动物原虫病学[M].北京： 中国农业大学出版社， 2000：165-174. [5] 索勋，蔡建平.禽球虫病[M].北京：中国农业出版社，2004. [6] ZHANG Q， PIAO X L， PIAO X S，et al.Preventive effect of Coptis chinensis and berberine on intestinal injury in rats challenged with lipopolysaccharides[J]. Food Chem Toxicol，2011，49：61-69. [7] 洪美珍.黄连素联合利福定灌肠治疗小儿细菌性痢疾的疗效观察[J].中国医学创新， 2010，7（4）：18 [8] STIFF M I，BAFUNDO K W. Development of immunity in broilers continuously exposed to Eimeria sp.[J].Avian Dis ，1993，37（2）：295-301. [9] 角田清.鸡球虫病[M].陈谊，明如镜，译.上海：上海科学技术文献出版社， 1996. [10] JOHNSON J，REID W M.Anticoccidial drugs：lesion scoring techniques in battery and floorpen experiments with chickens[J].Exp Parasitol，1970，28（1）：30-36. [11] GU S，CAO B，SUN C R，et al.A metabolomic and pharmacokinetic study on the mechanism underlying the lipidlowering effect of orally administered berberine[J].Mol Biosyst，2015，11（2）：463-474. [12] 陈汉忠，韦英益，李义平，等.强效艾美耳牌鸡球虫苗的免疫效果的研究[J].中国预防兽医学报，2002，24（6）：459-463.
