林麝泌香机制研究进展

����l�(����'ޮ��v���vߞ���i�Ov� ��]6�Nu�Mu�M6�^?������Mv�m���t�M�rmwםz��u�_5�o�]�㞻��t�_�]y��E� L�� ���jv��h����r۫z�ߢ���k��מ�^����]���i��i��i�f���"http://www.wufanghuizhong.com/p/zongjie/" target="_blank" class="keylink">总结前人经验的基础上，发现下丘脑-垂体-性腺轴激素均能诱导林麝发生泌香反应，且出现泌香反应所需的时间是雄性激素最短、LH（促黄体生成素）次之、LRH（促黄体生成素释放激素）最长，这说明下丘脑-垂体-性腺轴激素是调节林麝麝香分泌活动关键因素。与此类似，汪建隆等[23]的研究结果表明促卵泡素（FSH）与LH可以影响麝香分泌。此外洪沂生等[24-26]在对外源激素诱导林麝泌香方面做了大量的研究，结果表明外源雄性激素的诱导可提高林麝的泌香量，并可使切除睾丸和附睾的雄麝、失去自然泌香能力的雄麝和非泌香期的雄麝重新分泌麝香。也有研究表明LRH（促黄体激素释放激素）类似物对麝泌香具有诱导作用，由于LRH类似物的作用与LRH相仿，从而也说明麝的泌香受促黄体生成素释放激素LRH的调节作用[27]。尹淑媛， 戴卫国[28]进一步证明了外源雄性激素可诱导雄麝的泌香活动。此外，不同年龄阶段、不同泌香周期公麝的雄激素含量均有明显的变化规律。据白康等[29]研究表明，非泌香期粪样中睾酮含量较低，到了泌香期初期，睾酮含量急剧升高，显著高于非泌香期。在泌香期盛期，睾酮的含量达到最高峰，显著高于其他各个时期。这与雄性动物在繁殖期睾酮水平显著高于非繁殖期结果一致。以上研究结果表明，性腺轴激素与林麝的泌香反应过程密切相关。这说明性腺轴激素能够诱导林麝产生泌香活动，是调节林麝麝香分泌活动的关键因素。

3 林麝泌香的分子机制研究进展

近年来随着分子生物学技术的迅猛发展，对林麝泌香相关的研究开始从组织解剖水平深入到泌香分子机制的研究。目前学者们在林麝的遗传多样性方面进行了大量的研究[30-33]。在此基础上，陈轩[34]分析了林麝AFLP（扩增片段长度多态性）的多态性与产香量的关系，结果表明，麝香高产组在多态位点比率（PPL）上极显著高于参照组和低产组，在遗传多样性水平上也有更高的整体竞争优势，这与赵莎莎[35]的研究结果一致。同时这也提示，林麝泌香能力并不是由单基因控制，而是跟个体整体遗传素质相关、受多基因影响和调控的。因此研究林麝泌香的分子机制和提高林麝产香量宜采用间接的方法，先筛选出可能与泌香形状相关的标记然后逐步缩小范围验证。此外，赵莎莎[35]的研究发现了2个微卫星位点的基因型与麝香产量呈显著正相关，这为林麝泌香关联基因的后续研究提供了优先的分子标记与方法。

但上述通过在基因组水平上大规模设计引物筛选多态性的方法并不能准确地阐明林麝泌香过程的分子调控机制。因此学者们逐渐将注意力集中在与林麝泌香过程调控密切相关的激素基因上。邹方东等[36]对林麝活化素基因beta-A亚基成熟肽序列的克隆和分析，成功克隆了与生殖及产香相关的核基因（活化素）。王勤等[37]克隆了林麝FSH（促卵泡素）和LH基因并对其进行了序列分析，这为开展林麝泌香过程中基因的表达提供了基础与方法借鉴。此外，毕书增等[22]、尹淑媛等[38]的研究结果表明，雄性激素是诱导林麝产生泌香反应能力最强的激素。而雄性激素必须与雄性激素受体结合才能发挥生理生化功能，因此雄性激素受体很可能在林麝泌香过程中发挥这重要作用。为了尝试找到雄性激素受体多态性位点变异与泌香量之间的关系，白康[39]开展了林麝雄性激素受体多态性与泌香量关系的研究，结果表明，林麝雄性激素受体基因外显子1，4，8在陕西雄麝样品中不存在多态性。这说明这3个外显子在编码蛋白质时具有保守性，对林麝的生殖和生理有重要的作用。虽然没有检测到林麝雄性激素受体基因外显子1，4，8的多态性，但这为开展林麝泌香机制的研究提供了新的思路和方法借鉴。

4 问题及展望

4.1 存在的问题

4.1.1 炒种情况严重，大大阻碍了泌香机制的研究 目前，在整个林麝养殖产业中存在非常严重的炒种问题，每对林麝的价格在7万～8万，昂贵的种源成本大大降低了林麝产香的盈利能力，也大大提高了林麝研究的成本，这种现象不仅严重阻碍了林麝泌香机制的研究，而且不利于整个林麝养殖产业的健康发展。

4.1.2 林麝尚未完全驯化，不利于开展泌香机制相关研究 林麝的野性是开展林麝泌香机制研究最大的障碍。自从1958年开展人工养殖林麝以来，全国陆陆续续开展了林麝的驯化研究，并取得了一定的成果，其中包括陕西镇坪、四川马尔康等养殖基地[40-42]。但由于种种原因，林麝的驯化研究进展缓慢，造成了新生仔麝的野性依然较强。这常常给样品采集带来一定的困难，也给林麝带来强烈的应激反应。强烈的应激反应不仅给实验数据的可靠性与稳定性造成一定程度的影响，还对林麝自身的健康造成不利影响。

4.1.3 科研人员少，林麝泌香研究进展缓慢 虽然麝香的入药历史悠久，但我国从1958年才开始进行人工养麝的研究。相对于常见猪、鸡、牛等，专门从事林麝研究的科研人员紧缺。这使得先进的分子生物学技术方在林麝上应用的时间相对靠后，这也大大地降低了林麝泌香机制相关研究的进展。

4.2 展望

4.2.1 新技术新方法的利用将大大加快林麝泌香机制研究进展 随着分子生物学技术的迅猛发展，以前林麝泌香研究过程中的一些问题迎刃而解，如白康[38]建立了一种从林麝毛发重提取总DNA的高效方法。这种方法适用于从珍惜野生动物、应激强烈的动物及难以保定的大家畜基因组DNA的提取，而不用采血或者组织块，这将大大降低对圈养林麝的应激。同时白康等[28]研究了各时期林麝粪便中睾酮和雌二醇激素含量变化，这大大降低了林麝由于采血带来的应激，有助于濒危动物林麝的保护和利用，具有重要的学术价值和经济价值。此外，今年来发展起来的Real-time PCR，in situ hybridization，Western Blot等技术也为寻找林麝泌香相关基因及其表达量测定等提供技术支撑。

4.2.2 加强林麝驯化，为林麝泌香机制研究提供保障 野性是开展林麝泌香机制研究的最大障碍，因此，只有大力加强林麝驯化研究，才能为开展林麝遗传繁育研究、泌香机制研究和整个林麝产业的发展打下坚实基础。不同于其他家养动物的漫长驯化过程[43-44]，林麝从1958年才开始人工养殖驯化。虽然目前林麝驯化进展缓慢，但随着近年来医药企业对林麝产业的重视和国家的相关政策支持，林麝的驯化工作将出现较大的新进展，为林麝泌香机制研究提供保障。

4.2.3 圈养林麝种群规模不断扩大，有利于泌香机制的研究 随着对林麝和麝香应用价值的逐渐深入，医药公司为了保证麝香品质的稳定，必须建立自己的原料供应基地。如四川逢春医药有限公司在陕西镇坪和四川宝兴建立了林麝养殖基地。福建漳州片仔癀麝业有限公司在四川米亚罗和陕西建拥有大型林麝养殖基地，存栏量达700余头[11]。与小型养殖户不同，这些大型的林麝养殖企业和单位更注重林麝的泌香性能。因此随着林麝种群数量的不断扩大，林麝价格也将随之下降，这有利于开展林麝泌香性能的选育提高，也对林麝泌香机制的研究有积极的促进作用。

综上所述，目前林麝泌香机制研究尚处于尝试阶段，存在着各种各样的问题。但随着国家对林麝养殖产业的扶持和大企业对林麝养殖的积极参与，以及先进方法和先进技术的应用，林麝泌香机制的研究将会产生新的突破，有力地促进我国中医药事业的发展。

[参考文献]

[1] Goh C L， Kwok S F. A simple method of qualitative analysis for musk ambrette， musk ketone and musk xylene in cologne[J]. Contact Dermatitis， 1986，14（1）： 53.

[2] 中国药典.一部[S]. 2010：361.

[3] Mishra R K， Arora R B， Seth S D. Anti-inflammatory activity of musk[J]. J Pharm Pharmacol， 1962， 14（1）： 830.

[4] Kimura M， Osada E， Waki I. Fundamental research for the pharmacological activity of oriental drugs[J]. Yakuganku Zasshi， 1968， 88（2）： 125.

[5] 曹喜红， 周远大. 麝香抗炎作用的研究进展[J]. 中国药房， 2007， 18（21）： 1662.

[6] 尹士敏， 王士贤. 麝香的药理作用及临床研究近况[J]. 天津药学， 2002， 14（3）： 42.

[7] Seth S D， Mukhopadhyay A B， Prbhakar M C， et al. Antihistaminic and spasmolytic effects of musk[J]. Jpn J Pharmacol， 1973， 23（5）： 673.

[8] 邹慧兰， 郭宏伟， 唐婕， 等. 麝香保心丸联合阿司匹林对稳定型心绞痛患者APN，ET-1，NO的影响[J]. 中西医结合心脑血管病杂志， 2013， 11（2）： 143.

[9] 王坤， 郝新强， 刘树强. 中国林麝养殖的发展现状、研究概述和经济效益分析[J]. 中国畜牧杂志， 2010， 46（18）： 14.

[10] 吴民耀， 王念， 惠董娜， 等. 林麝保护的现状及研究进展[J]. 重庆理工大学学报：自然科学版， 2011， 25（1）： 34.

[11] 李林海， 黄祥云， 刘刚， 等. 我国麝养殖种群现状及养殖业发展的分析[J]. 四川动物， 2012， 31（3）： 492.

[12] 尹淑媛， 戴卫国. 雄麝的香腺和香囊在麝香分泌及形成中的作用[J]. 动物学杂志， 1991， 26（4）： 23.

[13] 毕书增， 颜于宏， 秦在贤， 等. 原麝麝香腺囊解剖和组织学的初步研究[J]. 野生动物保护与利用， 1980（1）： 14.

[14] 孙竹珑， 胡佐芳. 林麝香腺解剖及组织结构之探讨[J]. 西南民族学院学报：畜牧兽医版， 1988（1）： 29.

[15] 冯文和， 游育信， 雍慧仪， 等. 林麝麝香腺的组织学观察[J]. 动物学杂志， 1981（2）： 33.

[16] 芮菊生， 陈海明， 李次兰， 等. 麝香腺分泌周期中组织学及组织化学的初步研究[J]. 动物学杂志， 1984（1）： 13.

[17] 沈琰， 毕书增， 朱定轩， 等. 林麝泌香盛期前麝香腺囊电镜结构的初步研究[J]. 动物学杂志， 1984（3）： 11.

[18] 毕书增， 沈琰， 朱定轩， 等. 麝泌香盛期麝香囊超微结构和麝香分泌研究[J]. 兽类学报， 1985， 5（2）： 81.

[19] 毕书增， 张治国， 贾林征， 等. 麝泌香盛后期麝香腺囊的显微与超微结构和麝香分泌研究[J]. 兽类学报， 1987， 7（2）： 96.

[20] 毕书增， 关强， 安根录， 等. 麝试验泌香香腺超微结构和麝香分泌研究[J]. 电子显微学报， 1988（3）： 29.

[21] 毕书增， 贾林征， 关强， 等. 麝年周期麝香腺囊超微结构和麝香分泌形成研究[J]. 中国药学杂志， 1993， 28（11）： 653.

[22] 毕书增， 颜于宏， 金绍忠， 等. 下丘脑-垂体-睾丸系统调节麝香分泌和提高麝香产量的初步研究[J]. 中药材科技， 1980 （4）： 18.

[23] 汪建隆， 黄新民， 朱定轩. 促性腺激素对林麝泌香的影响[J]. 兽类学报， 1981， 2（1）： 105.

[24] 洪沂生， 李复东， 邓文明， 等. 麝泌香与雄性激素的关系[J]. 中药材科技， 1981 （1）： 19.

[25] 洪沂生， 李复东， 邓文明， 等. 用雄性激素诱导麝泌香对增产麝香的意义[J]. 中药材科技， 1981 （2）： 11.

[26] 洪沂生， 李复东， 邓文明， 等. 用雄性激素诱雄麝泌香在生产上应用的探讨[J]. 中药材科技， 1981 （3）： 16.

[27] 汪建隆， 黄兴湖， 杨昌金， 等. 促黄体生成素释放激素类似物对林麝泌香的影响[J]. 特产研究， 1986 （4）： 1.

[28] 尹淑媛， 戴卫国. 雄激素生理诱导雄麝第二次泌香中试实验研究[J]. 成都科技大学学报， 1990 （54）： 29.

[29] 白康， 任战军， 王永奇， 等. 林麝泌香期性激素变化及其与泌香量的关系[J]. 中国兽医学报， 2013， 33（6）： 956.

[30] 邹方东. 林麝细胞遗传学及分子标记微卫星的研究[D]. 成都： 四川大学，2005.

[31] 张述超， 岳碧松， 邹方东. 林麝微卫星座位的分离与鉴定[J]. 动物学研究， 2007， 28（1）： 24.

[32] 彭红元， 陈伟才， 岳碧松， 等. 麝属分子系统进化地位的再分析[J]. 四川动物， 2011， 30（4）： 530.

[33] Huang J， Li Y Z， Li P， et al. Genetic quality of the Miyaluo captive forest musk deer （Moschus berezovskii） population as assessed by microsatellite loci[J]. Biochem Systemat Ecol， 2013， 47： 25.

[34] 陈轩. 林麝AFLP的多态性研究及产麝性能的标记分析[D]. 杭州： 浙江大学，2007.

[35] 赵莎莎. 圈养林麝遗传多样性及泌香性能关联标记的分析研究[D]. 杭州： 浙江大学，2009.

[36] 邹方东， 张义正， 杨楠， 等. 林麝、马麝及梅花鹿活化素基因βA亚基成熟肽序列的克隆和分析[J]. 动物学杂志， 2004， 39（3）： 22.

[37] 王勤， 张修月， 王中凯， 等. 林麝促卵泡激素和促黄体激素基因的克隆及其序列分析[J]. 四川动物， 2012， 31（1）： 77.

[38] 尹淑媛， 戴卫国， 王树炳， 等. 外源性雄激素连续三年生理诱导雄麝二次泌香的研究[J]. 成都科技大学学报， 1990 （5）： 41.

[39] 白康. 林麝雄性激素受体多态性和性激素水平与其泌香量关系的研究[D].杨凌： 西北农林科技大学，2012.

[40] 张义正， 邓正已， 李正昌. 林麝的驯化及异地移养[J]. 中药材， 1985 （2）： 14.

[41] 邓凤鸣. 林麝的驯化与控制放牧[J]. 野生动物， 1986 （4）： 35.

[42] 胡周强， 封孝兰. 林麝幼仔集群习性培育试验初报[J]. 特产研究， 2009 （3）： 5.

[43] Bruford M W， Bradlley D G， Luikart G. DNA markers reveal the complexity of livestock domestication[J]. Nat Rev Genet， 2003， 4： 900.

[44] Zeder M A， Emshwiller E， Smith B D， et al. Documenting domestication： the intersection of genetics and archaeology[J]. Trends Genet， 2006， 22： 139.

Research progress on musk secretion mechanism of forest musk deer

JIE Hang， FENG Xiao-lan， ZHAO Gui-jun， ZENG De-jun， ZHANG Cheng-lu， CHEN Qiang*

（Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation， Chongqing 408435， China）

[Abstract] Forest musk deer （Moschus berezovskii）， a rare wild medicinal animal， is listed under the category of the state key protected wildlife list of China. Musk， secreted by the musk glands， is with high economic and medicinal value and used as precious traditional medicine in China. In order to meet the needs of musk in Chinese traditional medicine， forest musk deer farming was conducted in 1950s， but the research progress on musk secretion mechanism was slow. Therefore， by reviewing the histological and anatomical structure of forest musk deer musk gland， the relationship between sex hormones and the musk secretion process， and the molecular mechanism of the musk secretion， the existing problems in investigating the musk secretion mechanism were analyzed and the development trends in this field were also discussed， in order to provide a reference for further studies on the musk secretion mechanism and improve musk production of forest musk deer.

[Key words] forest musk deer; cultivation; musk secretion mechanism

doi：10.4268/cjcmm20142309

[责任编辑 丁广治]